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A new culture medium for recovering the agents of Cryptococcosis from environmental sources
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Silva, Dulcilena de Matos Castro e

; Santos, Dayane C.S.

; Pukinskas, Sandra R.B.S.

; Oshida, Julia T.U.

; Oliveira, Lidiane

; Carvallho, Anderson F.

; Melhem, Márcia S.C.

Brazilian Journal of Microbiology

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Jun 2015, Volume 46 Nº 2 Páginas 355 - 358

Resumo: En | Texto: En | PDF: En

The isolation of Cryptococcosis agents from environmental samples may be difficult due to the presence of groups of fast-growing fungi. We propose a new culture medium based on a modification of Dichloran Rose-Bengal Chloramphenicol Medium (DRBCm) to detect colonies of Cryptococcus neoformans. Our results indicate that DRBCm is superior to the classical Bird Seed Agar in its ability to detect colonies of C. neoformans.

https://doi.org/10.1590/S1517-838246220130726 2456 downloads

Novos aspectos na evolução clínica da pitiríase versicolor
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Framil, Valéria Maria de Souza

; Melhem, Márcia S. C

; Szeszs, Maria Walderez

; Zaitz, Clarisse

Anais Brasileiros de Dermatologia

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Dez 2011, Volume 86 Nº 6 Páginas 1135 - 1140

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

FUNDAMENTO: A pitiríase versicolor é uma doença infecciosa causada por várias espécies de Malassezia com uma tendência a se tornar recidivante ou crônica. OBJETIVOS: Este trabalho foi conduzido na tentativa de conhecer a evolução clínica da pitiríase versicolor em relação ao número de recidivas após um tratamento adequado no período de 12 meses e correlacionar o número de recidivas com as espécies de Malassezia isoladas. MATERIAL E MÉTODOS: Cento e dois pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial de pitiríase versicolor foram acompanhados por um período de 12 meses para observarmos o número de recidivas da doença. RESULTADOS: A pitiríase versicolor, após um tratamento adequado, apresentou três tipos de evolução clínica num período de 12 meses: pitiríase versicolor sem nenhum episódio de recidiva (32,35%); pitiríase versicolor recidivante, com um a quatro episódios de recidiva (52,94%) devidos a fatores de predisposição relacionados; e pitiríase versicolor crônica, com mais de quatro episódios de recidiva (14,70%) sem nenhuma relação com fatores de predisposição. CONCLUSÕES: A pitiríase versicolor apresentou uma evolução clínica de acordo com o número de episódios de recidiva da doença analisados durante um período de 12 meses que pode ser considerada da seguinte maneira: pitiríase versicolor com cura clínica e micológica, pitiríase versicolor recidivante e pitiríase versicolor crônica.

BACKGROUND: Pytiriasis versicolor is an infectious disease caused by several Malassezia species which has a tendency to become relapsing or chronic. OBJECTIVES: This study was conducted in an attempt to investigate the clinical course of pityriasis versicolor with regard to the number of relapses after a 12-month therapy and correlate this number with isolates of Malassezia species. MATERIAL AND METHODS: 102 patients with clinical and laboratory diagnosis of pityriasis versicolor were monitored for 12 months to investigate the number of relapsing episodes of the disease. RESULTS: After appropriate treatment, pityriasis versicolor presented three types of clinical course: pity - riasis versicolor without relapsing episodes (32.35%), relapsing pityriasis versicolor with one to four relapsing episodes (52.94% ) due to associated predisposing factors, and chronic pityriasis versicolor with more than four relapsig episodes (14.70%) with no relation to predisposing factors. CONCLUSIONS: The clinical course of pityriasis versicolor varied according to the number of relapsing episodes of the disease analyzed over a period of 12 months and can be classified as follows: pityriasis versiolor with clinical and mycological clearing, relapsing pityriasis versicolor and chronic pityriasis versicolor.

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Vulvovaginal candidiasis in Mato Grosso, Brazil: pregnancy status, causative species and drugs tests
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Dias, Luciana Basili

; Melhem, Márcia de Souza Carvalho

; Szeszs, Maria Walderez

; Meirelles Filho, José

; Hahn, Rosane Christine

Brazilian Journal of Microbiology

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Dez 2011, Volume 42 Nº 4 Páginas 1300 - 1307

Resumo: En | Texto: En | PDF: En

Causative agent in majority of VVC is Candida albicans, but infection due to non-C. albicans is common. Use of empiric antifungal therapy in Brazil due to syndromic management of vulvovaginitis could act as risk factor for increase resistance among VVC causative agents. From Mato Grosso patients, 160 with culture-proved among 404 women who had clinical symptoms of VVC, were enrolled in this study. 70 non-pregnant women and 90 pregnant women were included. Candida albicans was the most prevalent, representing 72.9% in the non-pregnant group and 92.3% in the pregnant group. Differences in species distribution were noted between the two groups, being C. parapsilosis the second more prevalent species among non-pregnant women. Susceptibility testing revealed high susceptibility to fluconazole (except for C. krusei), itraconazole, ketoconazole, and amphotericin B regardless the species (C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei) analyzed.

5000 downloads

Avaliação do método de disco-difusão para determinação da eficácia da terbinafina in vitro em agentes de micoses superficiais e subcutâneas
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Diogo, Hilda Conceição

; Melhem, Márcia

; Sarpieri, Aldo

; Pires, Mario Cezar

Anais Brasileiros de Dermatologia

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Jun 2010, Volume 85 Nº 3 Páginas 324 - 330

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

FUNDAMENTOS: As micoses superficiais e subcutâneas têm alta prevalência e, muitas vezes, caráter crônico, necessitando tratamentos tópicos e/ou sistêmicos com antifúngicos. As drogas de escolha são azóis e alilaminas (terbinafina). É necessário avaliar a eficácia das drogas para tratamento em humanos e em animais. Estudos para avaliar in vitro a ação dos antimicóticos são raros, especialmente, contra fungos filamentosos. OBJETIVO: Avaliar a eficácia in vitro da terbinafina pelo método de disco-difusão contra fungos filamentosos e leveduras agentes de micoses. MÉTODOS: Avaliou-se a ação da terbinafina (0,125µg-100µg) contra dez espécies fúngicas pelos métodos discodifusão e microdiluição/referência, para determinar a concentração inibitória mínima (MIC). RESULTADOS: Observou-se alta sensibilidade à terbinafina em: T. rubrum, M. gypseum, T. mentagrophytes, T. tonsurans, M. canis, C. carrionii e E. floccosum (halo ≥ 40mm com disco de 0,125µg). S. hyalinum e C. parapsilosis foram considerados sensíveis, mas com halos menores. Fusarium spp. apresentou menor sensibilidade (halo=12mm com disco de 2µg; MIC 8µg/mL). CONCLUSÕES: Os resultados reiteram estudos anteriores quanto à alta eficácia da terbinafina em relação a dermatófitos. A técnica de disco-difusão foi de fácil aplicação e adequada na rotina de laboratórios clínicos.

BACKGROUND: Superficial and subcutaneous mycoses have a high prevalence and, often, chronic evolution. Therefore, they need extensive treatment with topic and/or systemic antifungal agents. Azoles and alilamines (terbinafine) are first-choice drugs to treat human and animal infections. Thus, evaluation of the efficacy of these drugs is important for a successful treatment. However, there are few studies that evaluate the in vitro activity of antifungal agents. OBJECTIVE: To evaluate the in vitro efficacy of terbinafine activity against filamentous fungi and yeasts that cause mycoses. METHOD: The in vitro activity of terbinafine (0.125-100µg) against 10 fungi species was evaluated by the diskdiffusion and microdilution/reference methods to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). RESULTS: We found a high susceptibility to terbinafine in: T. rubrum, M. gypseum, T. mentagrophytes, T. tonsurans, M. canis, C. carrionii and E. floccosum (halo ≥ 40mm with 0.125µg disk). S. hyalinum and C. parapsilosis were considered susceptible, but less than the others. Fusarium spp. showed the lowest susceptibility (halo=12mm with 2µg disk; MIC 8µg/mL). CONCLUSIONS: The results of this research confirm previous findings about the efficacy of terbinafine. The drug was shown to be highly effective to treat dermatophyte infections. The disk-diffusion method was easy to use and is a suitable technique for routine use in clinical laboratories.

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Pitiríase versicolor circinada: isolamento de Malassezia sympodialis - Relato de caso
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Framil, Valéria Maria de Souza

; Melhem, Márcia S.C.

; Szeszs, Maria Walderez

; Corneta, Elaine Cristina

; Zaitz, Clarisse

Anais Brasileiros de Dermatologia

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Abr 2010, Volume 85 Nº 2 Páginas 227 - 228

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

Os autores descrevem caso de pitiríase versicolor circinada, cujo agente etiológico isolado foi Malassezia sympodialis em uma mulher de 34 anos. O isolamento e identificação da Malassezia sympodialis foi em ágar Dixon modificado e o método molecular para confirmação da espécie foi PCR-RFLP (polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis).

The authors report a case of pityriasis versicolor circinata whose isolated etiologic agent was Malassezia sympodialis in a 34-year-old woman. The isolation and identification of Malassezia sympodialis were accomplished with modified Dixon's agar, and the molecular method used to confirm the species was polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis (PCR-RFLP).

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Pitiríase versicolor: isolamento e identificação das principais espécies de Malassezia
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Framil, Valéria Maria de Souza

; Melhem, Márcia S. C

; Szeszs, Maria Walderez

; Corneta, Elaine Cristina

; Zaitz, Clarisse

Anais Brasileiros de Dermatologia

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Fev 2010, Volume 85 Nº 1 Páginas 111 - 114

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

As espécies do gênero Malassezia isoladas foram: Malassezia sympodialis (16,66%), Malassezia furfur (12,50%), Malassezia globosa (11,45%) e Malassezia slooffiae (2,10%). A Malassezia sympodialis foi a espécie que predominou em nosso estudo. As espécies de Malassezia identificadas não mostraram correlação com as variantes clínicas e com a distribuição das lesões de pitiríase versicolor quanto às regiões do corpo.

Species of the genus Malassezia isolated were: Malassezia sympodialis (16.66%), Malassezia furfur (12.50%), Malassezia globosa (11.45%), and Malassezia slooffiae (2.10%). Malassezia sympodialis predominated in the study. The species of Malassezia identified did not show correlation with clinical variants and with the distribution of pityriasis versicolor lesions in relation to areas of the body.

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Brazilian flora extracts as source of novel antileishmanial and antifungal compounds
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Tempone, André Gustavo

; Sartorelli, Patrícia

; Teixeira, Denise

; Prado, Frederico O

; Calixto, Ivete ARL

; Lorenzi, Harri

; Melhem, Márcia SC

Memórias do Instituto Oswaldo Cruz

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Ago 2008, Volume 103 Nº 5 Páginas 443 - 449

Resumo: En | Texto: En | PDF: En

Natural products have long been providing important drug leads for infectious diseases. Leishmaniasis is a protozoan parasitic disease found mainly in developing countries, and it has toxic therapies with few alternatives. Fungal infections have been the main cause of death in immunocompromised patients and new drugs are urgently needed. In this work, a total of 16 plant species belonging to 11 families, selected on an ethnopharmacological basis, were analyzed in vitro against Leishmania (L.) chagasi, Leishmania (L.) amazonensis, Candida krusei, and C. parapsilosis. Of these plant species, seven showed antifungal activity against C. krusei, five showed antileishmanial activity against L. chagasi and four against L. amazonensis, among them species of genus Plectranthus. Our findings confirm the traditional therapeutic use of these plants in the treatment of infectious and inflammatory disorders and also offer insights into the isolation of active and novel drug prototypes, especially those used against neglected diseases as Leishmaniasis.

5141 downloads Citado 7 vezes em SciELO

Molecular diversity of serial Cryptococcus neoformans isolates from AIDS patients in the city of São Paulo, Brazil
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Martins, Marilena A

; Pappalardo, Mara CSM

; Melhem, Márcia SC

; Pereira-Chioccola, Vera L

Memórias do Instituto Oswaldo Cruz

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Nov 2007, Volume 102 Nº 7 Páginas 777 - 784

Resumo: En | Texto: En | PDF: En

Despite highly active anti-retroviral therapy, cryptococcal meningoencephalitis is the second most prevalent neurological disease in Brazilian AIDS patients, being frequently a defining condition with several episodes. As knowledge of Cryptococcus neoformans isolates in the same episode is critical for understanding why some patients develop several episodes, we investigated the genotype characteristics of C. neoformans isolates in two different situations. By pulsed field gel electrophoresis and random amplifield polymorphic DNA analysis, 54 isolates from 12 patients with AIDS and cryptococcosis were analyzed. Group 1 comprised 39 isolates from nine patients with a single episode and hospitalization. Group 2 comprised 15 isolates from three patients with two episodes and hospitalizations. Except for three patients from group 1 probably infected with a single C. neoformans isolate, the other nine patients probably were infected with multiple isolates selected in different collection periods, or the infecting isolate might have underwent mutation to adapt and survive the host immune system and/or the antifungal therapy. However, the three patients from group 2 presented genetic diversity among isolates collected in both hospitalizations, possibly having hosted the initial isolate in both periods. These data, emphasize that Cryptococcus diversity in infection can contribute to strategies of treatment and prevention of cryptococcosis.

1964 downloads

Isolamento e atividades biológicas de produtos naturais das esponjas monanchora arbuscula, aplysina sp. petromica ciocalyptoides e topsentia ophiraphidites, da ascídia didemnum ligulum e do octocoral carijoa riisei
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Kossuga, Miriam H.

; Lira, Simone P. de

; Nascimento, Andréa M.

; Gambardella, Maria Teresa P.

; Berlinck, Roberto G. S.

; Torres, Yohandra R.

; Nascimento, Gislene G. F.

; Pimenta, Eli F.

; Silva, Marcio

; Thiemann, Otávio H.

; Oliva, Glaucius

; Tempone, André G.

; Melhem, Márcia S. C.

; Souza, Ana O. de

; Galetti, Fabio C. S.

; Silva, Célio L.

; Cavalcanti, Bruno

; Pessoa, Claudia O.

; Moraes, Manoel O.

; Hajdu, Eduardo

; Peixinho, Solange

; Rocha, Rosana M.

Química Nova

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Out 2007, Volume 30 Nº 5 Páginas 1194 - 1202

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

The investigation of extracts from six species of marine invertebrates yielded one new and several known natural products. Isoptilocaulin from the sponge Monanchora aff. arbuscula displayed antimicrobial activity at 1.3 mg/mL against an oxacillin-resistant strain of Staphylococcus aureus. Five inactive known dibromotyrosine derivatives, 2 6, were isolated from a new species of marine sponge, Aplysina sp. The sponges Petromica ciocalyptoides and Topsentia ophiraphidites yielded the known halistanol sulfate A (7) as an inhibitor of the antileishmanial target adenosine phosphoribosyl transferase. The ascidian Didemnum ligulum yielded asterubin (10) and the new N,N-dimethyl-O-methylethanolamine (11). The octocoral Carijoa riisei yielded the known 18-acetoxypregna-1,4,20-trien-3-one (12), which displayed cytotoxic activity against the cancer cell lines SF295, MDA-MB435, HCT8 and HL60.

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10.

Genotyping, serotyping and determination of mating-type of Cryptococcus neoformans clinical isolates from São Paulo State, Brazil
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Matsumoto, Marcelo Teruyuki

; Fusco-Almeida, Ana Marisa

; Baeza, Lilian Cristiane

; Melhem, Márcia de Souza Carvalho

; Medes-Giannini, Maria José Soares

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

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Fev 2007, Volume 49 Nº 1 Páginas 41 - 47

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

Cryptococcus neoformans, pertencente à classe dos basidiomicetos, é um importante patógeno, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Neste estudo, 47 isolados clínicos de C. neoformans de várias regiões do Estado de São Paulo foram avaliados quanto aos sorotipos e ao mating-type por PCR. A diversidade genética foi analisada por PCR-fingerprinting com a seqüência iniciadora específica para regiões microssatélite (GACA)4, RAPD com o iniciador 6 (Amersham Pharmacia Biotech) e por RFLP do gene PLB1 digerido com AvaI. Todos os isolados foram obtidos de pacientes HIV positivos e identificados como sorotipo A e MATalfa. A maioria dos isolados pertencia ao tipo molecular VNI (45/47) e apenas dois foram VNII quando analisados por PCR-fingerprinting e PCR-RFLP. Homogeneidade alta foi obtida com o iniciador (GACA)4, com a maioria dos isolados apresentando correlação alta (> 0.9). Os resultados do RAPD, por sua vez, revelaram maior heterogeneidade com número maior de perfis moleculares. Por PCR-RFLP, nenhum tipo molecular novo foi encontrado, realçando a idéia de que em genes conservados como PLB1, as diferenças podem ser resultantes de divergências evolutivas dentro do complexo C. neoformans, separando os isolados nos oito subtipos moleculares já estabelecidos. Nossos resultados fornecem novas informações sobre a epidemiologia molecular de C. neoformans na região sudeste do Brasil.

The basidiomycetous yeast Cryptococcus neoformans is an important fungal pathogen mainly in immunocompromised patients. In this study, 47 clinical isolates of C. neoformans from regions of São Paulo State were studied serologically by using the Crypto Check Iatron RM 304-K kit, their genetic diversity was estimated by PCR-fingerprinting with a microsatellite-specific sequence (GACA)4, RAPD with primer 6 (Amersham Pharmacia Biotech), PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of the phospholipase B gene (PLB1) digested with AvaI and mating type analysis by PCR. All 47 strains isolated from HIV positive patients included in this study were serotype A and MATalpha. The majority of the isolates (45/47) were VNI and only two were VNII by PCR-fingerprinting and PCR-RFLP analysis. High degree of homogeneity was observed when (GACA)4 was used, being highly correlated (> 0.9). In contrast, the RAPD analysis was more heterogeneous with higher number of molecular profiles. By PCR-RFLP, no new molecular type was found, enhancing the suggestion that the differences based on conserved gene as PLB1, can be resultant of ongoing divergent evolution within the C. neoformans complex, into the current eight subtypes. Our results furnish new information on the molecular epidemiology of C. neoformans in the southeast region of Brazil.

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11.

Neurocryptococcosis: diagnosis by PCR method
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Paschoal, Regina Célia

; Hirata, Mário Hiroyuki

; Hirata, Rosário Crespo

; Melhem, Márcia de Souza Carvalho

; Dias, Amanda Latercia Tranches

; Paula, Claudete Rodrigues

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

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Ago 2004, Volume 46 Nº 4 Páginas 203 - 207

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

A detecção de Cryptococcus neoformans em líquor foi otimizada pela técnica de PCR. A amplificação foi realizada nas áreas ITS e 5,6S do RNA ribossomal (rRNA). Foram estudados 72 líquors obtidos de casos de pacientes com e sem AIDS. Os pacientes eram portadores de meningite criptocócica (n = 56) e meningite ocasionada por outros agentes (n = 16). Os resultados demonstraram que a técnica tem alta sensibilidade, superior a cultura (85,7%) e ao teste da tinta da china (76,8%). A técnica de PCR pode detectar 1 célula/mL de líquor e é altamente específica. A análise comparativa dos três métodos, tinta da china, cultura e PCR, demonstrou que o último é muito mais sensível e específico, podendo ser aplicável como importante recurso laboratorial no diagnóstico da neurocriptococose.

Cryptococcus neoformans detection was optimized using PCR technique with the objective of application in the clinical laboratory diagnosis. The amplification area was ITS and 5,6S which encodes the ribosomal RNA (rRNA). A total of 72 cerebrospinal fluid (CSF) samples were used, obtained from cases with and without AIDS. The patients had cryptococcal meningitis (n = 56) and meningitis caused by other agents (n = 16). The results demonstrated that PCR test had the highest sensitivity rates, superior to culture (85.7%) and to India ink test (76.8%). PCR was found to be sensitive in detecting 1 cell/mL and highly specific since it did not amplify other fungal DNA. The comparative analysis of the methods showed that PCR is more sensitive and specific and is applicable as an important laboratorial resource for neurocryptococcosis diagnosis.

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12.

Cryptococcosis: a review of the brazilian experience for the disease
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Pappalardo, Mara C.S.M.

; Melhem, Márcia S.C.

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

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Dez 2003, Volume 45 Nº 6 Páginas 299 - 305

Resumo: Pt En | Texto: Pt En | PDF: Pt | PDF: En

Criptococose é micose sistêmica causada por Cryptococcus neoformans. A doença ocorre em pacientes com deficiência da imunidade celular. Com o aparecimento da doença AIDS, a incidência de criptococose aumentou, e a micose é uma das infecções oportunistas que definem um caso de AIDS. Após a era HAART, criptococose parece estar diminuindo no mundo todo, mas continua sendo uma doença prevalente no Brasil. Este artigo visa a análise da contribuição dos autores brasileiros sobre vários aspectos da doença.

Cryptococcosis is a systemic mycosis caused by Cryptococcus neoformans. The disease occurs in patients with cellular immunodeficiency. The incidence of cryptococcosis arises with aids, and mycosis is one of the opportunistic infections that defines AIDS. After the HAART era the occurrence of cryptococcosis decreased all over the world, but it still continues to be a prevalent disease in Brazil. Thus, we consider this paper to be very important as a result of our reviewing of Brazilian literature regarding some relevant aspects of that disease.

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